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NIH

Hibridación fluorescente in situ (HFIS)

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¿Qué es la HFIS?

La hibridación fluorescente in situ (HFIS) brinda a los investigadores una manera de visualizar y mapear el material genético en las células de un individuo, incluidos genes específicos o partes de los genes. Esto es importante para entender una variedad de anomalías cromosómicas y otras mutaciones genéticas. A diferencia de la mayoría de las otras técnicas usadas para estudiar cromosomas, la HFIS no tiene que realizarse en células que se estén dividiendo activamente. Esto hace que sea un procedimiento muy versátil.

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¿Cómo funciona la HFIS?

La HFIS es útil, por ejemplo, para ayudar a un investigador a identificar dónde se encuentra un gen específico dentro de los cromosomas de un individuo. El primer paso es preparar secuencias cortas de ADN monocatenario (de una sola hebra) que correspondan a una parte del gen que esté buscando el investigador. Estas secuencias se conocen como sondas. El siguiente paso es marcar estas sondas con uno de varios colores de tinte fluorescente.

El ADN está compuesto de dos hebras de moléculas complementarias que se unen entre sí como imanes químicos. Debido a que las sondas de los investigadores consisten en una sola hebra, éstas pueden unirse a la hebra complementaria del ADN, dondequiera que se encuentre en los cromosomas de una persona. Cuando una sonda se une a un cromosoma, su marcador fluorescente ofrece una manera para que los investigadores puedan ver su ubicación.

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¿Para qué se utiliza la HFIS?

Los científicos utilizan tres tipos diferentes de sondas de HFIS, cada una de las cuales tiene una aplicación diferente:

Las sondas de locus específicos se unen a una región específica de un cromosoma. Este tipo de sonda es útil cuando los científicos han aislado una pequeña parte de un gen y quieren determinar en qué cromosoma se encuentra el gen.

Las sondas alfoides o sondas centroméricas de repetición son generadas a partir de secuencias repetitivas encontradas a la mitad de cada cromosoma. Los investigadores usan estas sondas para determinar si un individuo tiene o no el número correcto de cromosomas. Estas sondas también pueden usarse junto con las "sondas de locus específicos" para determinar si a un individuo le falta material genético de un cromosoma en específico.

Las sondas de cromosomas enteros son, de hecho, colecciones de sondas más pequeñas, cada una de las cuales se une a una secuencia diferente a lo largo de un cromosoma específico. Al usar múltiples sondas marcadas con una mezcla de distintos tintes fluorescentes, los científicos pueden marcar cada cromosoma con su propio color único. El mapa resultante del cromosoma a todo color se conoce como un cariotipado espectral. Las ondas de cromosomas enteros son especialmente útiles para examinar anomalías cromosómicas, por ejemplo, cuando un segmento de un cromosoma está unido al final de otro cromosoma.

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Publicado: 21 de octubre 2015

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Glosario Hablado de Términos Genéticos